1. 茶葉中茶多酚的含量測(cè)定

茶多酚的顏色為淡黃至茶褐色略帶茶香，如果在堿性條件下易氧化褐變。遇鐵離子生成綠黑色化合物。

茶多酚是茶葉中多酚類物質(zhì)的總稱，為白色不定形粉末，易溶于水，可溶于乙醇、甲醇、丙酮、乙酸乙酯，不溶于氯仿。綠茶中茶多酚含量較高，占其質(zhì)量的15%～30%，茶多酚的主要成分為：黃烷酮類，花色素類，黃酮醇類和花白素類和酚酸及縮酚酸類6類化合物。其中以黃烷酮類（主要是兒茶素類化合物）最為重要，占茶多酚總量的60%～80%，其次是黃酮類，其他酚類物質(zhì)含量比較少。

2. 茶飲料中茶多酚含量的測(cè)定

定量測(cè)定方法.光度法———酒石酸亞鐵比色法.其測(cè)定原理是茶多酚類物質(zhì)能與亞鐵離子形成紫藍(lán)色絡(luò)合物.用分光光度法測(cè)定其含量.茶多酚標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制稱取提取純品0.2500g,加水溶解定容至250mL,混勻,即為每毫升含1mg提取純品的標(biāo)準(zhǔn)溶液(mg/mL).茶多酚的含量.茶多酚標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制.分別吸取茶多酚標(biāo)準(zhǔn)溶液1.0mL、2.0mL、3.0mL、4.0mL于4個(gè)50mL容量瓶中,各加水至10mL,再加酒石酸亞鐵溶液10mL,加入pH為7.5的磷酸緩沖液至刻度,混勻后用1㎝比色皿,以空白試劑作參比,于波長(zhǎng)540nm處測(cè)定吸光度(A),繪制出標(biāo)準(zhǔn)曲線.

3. 茶葉中茶多酚的含量測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)

茶多酚別名抗氧靈，維多酚，防哈靈，分子式為C17H19N3O，分子量281.36，主要成分黃烷醇類、花色苷類、黃酮類性狀白色無(wú)定形的結(jié)晶狀物質(zhì)。

茶多酚是茶葉中多酚類物質(zhì)的總稱，為白色不定形粉末，易溶于水，可溶于乙醇、甲醇、丙酮、乙酸乙酯，不溶于氯仿。綠茶中茶多酚含量較高，占其質(zhì)量的15%～30%，茶多酚的主要成分為：黃烷酮類，花色素類，黃酮醇類和花白素類和酚酸及縮酚酸類6類化合物。其中以黃烷酮類（主要是兒茶素類化合物）最為重要，占茶多酚總量的60%～80%，其次是黃酮類，其他酚類物質(zhì)含量比較少。

4. 茶葉中茶多酚的含量測(cè)定實(shí)驗(yàn)

以紅茶茶葉和綠茶茶葉為原料,考察浸提溫度、時(shí)間、固液比、溶劑濃度對(duì)茶多酚提取的影響,并對(duì)其提取率進(jìn)行了研究。

結(jié)合正交試驗(yàn),確定出了溶劑法提取茶多酚的最佳工藝條件。

結(jié)果表明：紅茶較優(yōu)的提取工藝條件為固液比1︰80,乙醇濃度60%,浸提溫度50℃,浸提時(shí)間30 min,此時(shí)茶多酚的提取率為20.35%;綠茶較優(yōu)的提取工藝條件為固液比1︰80,乙醇濃度50%,浸提溫度50℃,浸提時(shí)間40 min,此時(shí)茶多酚的提取率為25.44%。

5. 茶葉中茶多酚的提取及含量測(cè)定

從泡過(guò)的茶葉中提取茶多酚簡(jiǎn)單方法： 直接利用傳統(tǒng)工藝---溶劑提取法：將茶葉用極性溶劑浸漬，然后把浸取液進(jìn)行液—液萃取分離，最后濃縮得到產(chǎn)品。

（目前工業(yè)化生產(chǎn)主要采用此法） 溶劑提取法原理： 以水或乙醇為溶劑，采用水浴加熱至80℃ 保溫提取多次。合并提取液后用等體積的氯仿萃取，分出氯仿相后改用乙酸乙酯多次萃取，將乙酸乙酯大部回收后濃縮近干，冷凍干燥后用去離子水反復(fù)重結(jié)晶即得精品。但該法的缺點(diǎn)是操作費(fèi)時(shí)麻煩、溶劑消耗量大、毒性大、成本高、提取率低，在高溫下提取，茶多酚易氧化變質(zhì)等。提取茶多酚具體實(shí)施方案：

1.原理：利用茶多酚易溶于乙醇、乙酸乙酯，而不溶于氯仿的性質(zhì)來(lái)提取茶多酚。

2.器材與試劑： 器材：250ml的三口燒瓶，布袋，蒸發(fā)皿，分液漏斗等； 試劑：茶葉，碳酸鈉，乙醇，氯仿，乙酸乙酯，蒸餾水等。

3.提取步驟： a)提?。簩⒎鬯榈?0 g茶葉中加入2g碳酸鈉并放入布袋內(nèi)放好，置于三口燒瓶?jī)?nèi)，加乙醇50ml，加熱煮沸0.5h，傾出提取液至蒸發(fā)皿內(nèi)，再用10ml乙醇洗滌茶葉包，洗滌液并入提取液。b)分離純化：將裝有提取液的蒸發(fā)皿置于石棉網(wǎng)上加熱濃縮至提取液體積月約20ml，冷卻至室溫后將濃縮液移置分液漏斗，加入等量的氯仿萃取2次（萃取時(shí)振蕩要輕，防止乳化），水層用于制備茶多酚。將氯仿萃取后的水層用等量乙酸乙酯萃取2次，每次20min，合并乙酸乙酯萃取液。水浴減壓蒸餾（或旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀）回收乙酸乙酯，趁熱將殘液移入潔凈干燥好的蒸發(fā)皿，改用水蒸氣浴加熱濃縮至近干，冷卻至室溫后，放入冰箱內(nèi)冷凍干燥，將白色粉末茶多酚粗品，粗品用蒸餾水進(jìn)行重結(jié)晶，得茶多酚精品。干燥后稱量，計(jì)算產(chǎn)率。

6. 茶葉中茶多酚的含量測(cè)定實(shí)驗(yàn)報(bào)告

茶葉檢測(cè)項(xiàng)目介紹： 物理測(cè)試：外形檢測(cè)：形狀，嫩度，色澤，凈度等；內(nèi)質(zhì)檢測(cè)：香氣，滋味，湯色，雜質(zhì)，葉底等 化學(xué)指標(biāo)：水分，水浸出物，總灰分，水溶性灰分，水溶性灰分堿度，水不溶性灰分，酸不溶性灰分，干物質(zhì)含量，粗纖維，游離氨基酸，碎末茶，粉末，碎末，咖啡堿，茶多酚，凈含量，含氟量，山梨酸，苯甲酸，糖精鈉，環(huán)己基氨基磺酸鈉，新紅，赤蘚紅 重金屬及營(yíng)養(yǎng)元素：鉛，稀土，砷，銅，鉻，鎘，汞，錫 微生物指標(biāo)：菌落總數(shù)，大腸菌群，霉菌和酵母菌，致病菌（沙門氏菌，志賀氏菌，金黃色葡萄球菌），商業(yè)無(wú)菌 真菌毒素指標(biāo)：黃曲霉毒素

7. 茶葉中茶多酚的含量測(cè)定方法

化學(xué)指標(biāo)：水分，水浸出物，總灰分，水溶性灰分，水溶性灰分堿度，水不溶性灰分，酸不溶性灰分，干物質(zhì)含量，粗纖維，游離氨基酸，碎末茶，粉末，碎末，咖啡堿，茶多酚，凈含量，含氟量，山梨酸，苯甲酸，糖精鈉，環(huán)己基氨基磺酸鈉，新紅，赤蘚紅

8. 茶葉中茶多酚的含量測(cè)定原理

從字義上看，“渥”是指將茶葉灑上水，“堆”是指將茶葉堆起來(lái)，合起來(lái)渥堆就是將茶葉堆放成一定高度（通常在70厘米左右）后灑水，上覆麻布。追本溯源，黑茶最早是由綠茶演變而來(lái)，安化地區(qū)的茶農(nóng)將茶葉放在篾簍里，掛在火炕上的梭筒頂上，通過(guò)坑內(nèi)的松柴明火的熏制，茶葉會(huì)變得烏黑油潤(rùn)，滋味醇和，一些陳放多年的茶葉，滋味會(huì)更加的香醇。在長(zhǎng)途運(yùn)輸中，由于濕熱和微生物的作用，茶葉的色澤也會(huì)變得烏黑油潤(rùn)，滋味醇和，這個(gè)偶然的發(fā)現(xiàn)被茶農(nóng)們應(yīng)用于實(shí)踐中，發(fā)展為后來(lái)的“渥堆”這道工序。

渥堆的原理

從微生物學(xué)角度上說(shuō)，渥堆的原理是通過(guò)微生物胞外酶主導(dǎo)下的生化動(dòng)力以及熱主導(dǎo)下的物化動(dòng)力使茶葉成分發(fā)生一系列復(fù)雜化學(xué)變化，形成黑茶特有的風(fēng)味。傳統(tǒng)渥堆中存在著相當(dāng)數(shù)量的微生物，包括假絲酵母菌、黑曲霉菌、細(xì)菌等，這些微生物是新鮮茶葉在經(jīng)過(guò)高溫殺青及后來(lái)的揉捻、渥堆過(guò)程中產(chǎn)生，而且會(huì)隨著渥堆而不斷繁殖，在渥堆前30個(gè)小時(shí)，微生物數(shù)量會(huì)迅速增加，達(dá)到高峰期以后逐漸下降。渥堆的過(guò)程中，通過(guò)這些微生物的胞外酶分解茶葉中的大分子化合物，作為自身機(jī)體的構(gòu)成部分；另一方面，這些微生物會(huì)分泌一些小分子化合物。通過(guò)一吸一吐，茶葉中的內(nèi)含成分會(huì)發(fā)生巨大的改變，從而形成黑茶特有的品質(zhì)特征。

色澤方面

渥堆期間，茶葉中的葉綠素、胡蘿卜素和葉綠素比值不斷下降, 茶葉的外形色澤由黃綠轉(zhuǎn)變?yōu)辄S褐色或黑褐色,茶多酚因微生物酶促氧化和自動(dòng)氧化形成了少量葉黃素、葉紅素、葉褐素, 這對(duì)黑茶橙黃明亮湯色的形成將起到積極的作用。

香氣方面

黑茶在渥堆過(guò)程中形成了以萜烯醇類和芬環(huán)醇類、醛酮類為主體的香氣組分比。實(shí)驗(yàn)表明，黑茶中香氣組分有11種不同于綠茶的香氣成分。根據(jù)產(chǎn)地不同，其黑茶香氣感官特征各具特色：如湖南的“湘尖”具有松煙香，茯磚具有“菌花香”；四川的南路邊茶具有“油香”，而西路邊茶具有“煙焦氣”；云南普洱茶（熟茶）強(qiáng)調(diào)的則是一種特殊的“陳香”；廣西六堡茶的香氣除“醇陳”之外，還有松煙和檳榔氣味。黑茶香氣特征的不同，在一定程度上也是區(qū)分各地黑茶品質(zhì)特征的重要指標(biāo)。

滋味方面

我們知道茶多酚、咖啡堿、茶氨酸是茶葉的三種主要成分：茶多酚含量越低，滋味越醇和；咖啡堿是茶湯中的苦味來(lái)源；而氨基酸則是茯茶香氣、 滋味物質(zhì)形成的重要前體。經(jīng)過(guò)渥堆后，茶葉中的茶多酚、氨基酸含量下降，也就是茶中的苦澀、濃烈的滋味成分明顯減少。與此同時(shí)，茶葉中的醇和型滋味物質(zhì)增加，使黑毛茶的滋味趨于醇和，而且在微生物胞內(nèi)酶系統(tǒng)作用下，合成多種對(duì)人體有益的必需氨基酸，對(duì)改善黑茶品質(zhì)十分有利，而且還能提高黑茶的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值。此外，纖維素酶、蛋白酶的活性都有一定程度的增加，這能在一定程度上分解纖維素和蛋白質(zhì)，形成水溶性滋味物質(zhì)，對(duì)于改善黑毛茶的粗老味，提升茶湯厚度有十分重要的作用。

通過(guò)渥堆這一關(guān)鍵工藝，黑茶的色香味發(fā)生了顯著的變化，原本粗老苦澀的茶變得醇和不澀，湯色變?yōu)槌赛S或橙紅，香氣也具有典型的甜酒香或辛辣味。可見黑茶的品質(zhì)特征，與渥堆工藝密不可分。

9. 茶多酚含量測(cè)定方法

葉中內(nèi)含物質(zhì)的浸出是溶質(zhì)分子(浸出物)在固相(茶葉)與液相(水相)之間的分配，并逐漸達(dá)到平衡狀態(tài)。浸出過(guò)程包括：水相進(jìn)入茶葉固體內(nèi)并溶解茶葉內(nèi)含物，隨后溶質(zhì)從茶葉內(nèi)部液體中擴(kuò)散而達(dá)到茶葉表面，最后溶質(zhì)從茶葉表面通過(guò)液膜擴(kuò)散而達(dá)到外部水相的主體。在此過(guò)程中，水溫是影響茶葉內(nèi)含物浸出速度的關(guān)鍵影響因子之一。 　　茶葉沖泡溫度不同，內(nèi)含物在茶湯中的溶解度和溶解速率不同，從而影響茶湯中可溶性成分含量，形成不同口感，影響茶湯品質(zhì)。研究發(fā)現(xiàn)，綠茶沖泡時(shí)水溫從60℃上升至100℃時(shí)，茶多酚、咖啡堿和氨基酸的浸出率均呈上升趨勢(shì)，浸出率分別提高70.22%、59.30%和46.34%(。 　　烏龍茶沖泡過(guò)程中，隨著水溫的增加，水浸出物、茶多酚、可溶性糖、游離氨基酸和生物堿均顯著增加。 　　研究發(fā)現(xiàn)，隨著水溫提高(從80℃上升到100℃)，茶湯顏色發(fā)生顯著變化，抗氧化能力下降15.5%-36.6%，茶多酚、沒食子酸衍生物、黃烷-3-醇、羥基肉桂酸酯、茶黃素、咖啡堿含量分別上升17.2%、30.1%、45.5%、7.5%、18.1%和17.3%。 　　茶葉內(nèi)含特征物質(zhì)隨著沖泡水溫提高，在茶湯中的浸出率增加。水溫增加，有助于提高化合物在水中的溶解度以及水對(duì)茶葉組織的滲透能力；同時(shí)水溫提高，加速茶葉組織破壞，增加茶葉組織間的空隙，從而有利于茶葉內(nèi)含物質(zhì)的溶出。 　　茶葉中內(nèi)含物在茶湯中的浸出過(guò)程是一個(gè)動(dòng)態(tài)平衡過(guò)程，但不是簡(jiǎn)單的溶質(zhì)分子在水相中快速達(dá)到平衡狀態(tài)，而是溶質(zhì)分子從固相(茶葉)到液相(茶湯)中溶解、擴(kuò)散和傳質(zhì)的過(guò)程。在這個(gè)動(dòng)態(tài)平衡過(guò)程中，時(shí)間是影響溶質(zhì)分子在水相(茶湯)中含量的關(guān)鍵因素。 　　研究發(fā)現(xiàn)，沖泡時(shí)間與茶湯中內(nèi)含物質(zhì)濃度呈正相關(guān)，與單位時(shí)間浸出量呈負(fù)相關(guān)。沖泡時(shí)間越長(zhǎng)，茶湯中內(nèi)含物質(zhì)濃度越高，但單位時(shí)間浸出量降低。茶葉沖泡起始階段(1-2min)，茶多酚、氨基酸、咖啡堿、水溶性多糖等內(nèi)含物質(zhì)迅速溶解于茶湯中，茶湯中內(nèi)含物質(zhì)濃度比例與茶葉中內(nèi)含物質(zhì)比例相近。當(dāng)沖泡時(shí)間延長(zhǎng)時(shí)，茶湯中茶多酚、咖啡堿等高含量?jī)?nèi)質(zhì)成分浸出濃度高于氨基酸，從而導(dǎo)致酚氨比增大，苦澀味更為明顯。 　　水質(zhì)對(duì)茶葉品質(zhì)的影響包括兩方面，一方面水中有機(jī)物質(zhì)和無(wú)機(jī)物質(zhì)添加到茶湯中，不與茶葉內(nèi)含物作用，由于添加物質(zhì)本身的物理化學(xué)屬性，從而改變茶湯滋味、湯色和香氣等；另一方面，水中有機(jī)物或無(wú)機(jī)物與茶葉內(nèi)含物質(zhì)相互作用，產(chǎn)生新的化合物，從而改變茶湯滋味、湯色和香氣等品質(zhì)特征。 　　對(duì)茶葉品質(zhì)及其化學(xué)成分影響的水質(zhì)因子主要包括金屬離子、礦物質(zhì)離子、pH、水中氣體分子等。大量研究表明，Ca2+、Fe3+/Fe2+、Al3+等金屬離子是影響茶湯品質(zhì)關(guān)鍵因子之一，其原因是金屬離子與茶葉內(nèi)含物相互作用，形成絡(luò)合物從而改變茶湯滋味、湯色或香氣。由于茶葉富含多酚、氨基酸等弱酸性物質(zhì)，茶湯具有較強(qiáng)的緩沖能力，pH范圍明顯窄于飲用水pH范圍，因而水中pH對(duì)茶葉內(nèi)含物浸出的影響并不顯著。